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  T-even型噬菌体是一种毒性很强的噬菌体,平日被用作形式生物,正在领会=各样生★物历程▽ 中起着至闭要紧的效用。个中一个历程涉及○宿主劝○化噬菌体复制历程中DNA拓扑机闭的调动,由IIA 型DNA拓扑异构酶负责。虽然对原核和真核生物的拓扑异构酶举行了各样各 样的探求,但对病毒拓=扑异构□酶II的…明了 如故不敷充斥,卓殊是对T4噬菌体的怪异机闭域 构成。

  与其他构象形态沿途,这些○ 机闭供给 了噬菌体■拓 扑异构 酶II机制的鲜明■远景。卓殊是,正在T6噬菌体拓扑异构 =酶II的 冷◁冻电镜机闭中视察到的=过错■称二聚体彼此○…效用,ATP○ 酶机闭域和与D NA纠合的核心机闭域分歧揭示了ATP的异步利用和G段DNA的异步切割。噬菌体拓扑异构酶II的机○闭…★和功效的阐明不单抬高了对机制的领会以及与原核和真核同源物的进化好像之处,况且卓越了 其行为开 拓IIA型拓扑异构酶控制剂的模子的潜力。

  II A型DNA拓扑异构酶正在原核生▽○ 物、真核生物和病 毒的性命周期中起着○要 害□ 效用,正在DNA复制、转录、重组和染色体凝◁集 等众种生物历程△中,通过诱导DNA的瞬时双链○断 裂(○DSB■s),增进DNA拓扑机闭的调控。原核生物★和真核生物中IIA型DNA拓扑异构酶的机闭和功效特点自被觉察以 后,正在以 往的探求中获得了广博 的=探 ★ 求。IIA型▽DNA拓扑异构酶机闭的◁一个明显特点是存正在两个高度顽固的机闭域,这两…个机闭域与它们 的 催化功★效是弗成缺乏的:(1)ATP酶机闭域,平日行为同型二聚体,看待ATP和二价金属 离子(平日是Mg2+)的纠合是必弗□成◁少的,为酶 内 的构象转化供给所需的 ■能量。(2) DNA纠合/切割机闭域(也称为核 ■心机闭域,构制为同型二聚体)核苷酸○,具有纠合和切割双链DNA□ (dsDNA)的才能,称为G段,然后发 □生短暂○的DNA断裂,应允另一个DNA双链的通过…核苷酸,称为T段DNA。通过融合这些机闭域,IIA型DNA拓扑异构 酶从新结○合断裂的DNA 链,从而正=在不摧残基因组完▽善 性的境况下蜕变DNA○超螺旋的水平。

  正在IIA=型拓扑◁异构酶的规范机制中,G段DN A双链的两条链正在二价金 属离子(平日 为Mg2+)和ATP的存鄙人同时○□断裂。然而,来自真核生物Topo ▽II正在▽缺乏ATP的境况下的切△割测验证据注脚○核苷酸,单链缺口质粒DNA产品维持异步G段DNA切割的另一种机制凯发k8国际核苷酸。但到目前为止,机闭△探求尚未■■维持 这一机○制,也没 有确定这种自然单链缺口DNA-Topo II复合物机闭。迩来,几个探求小组报道了病毒■编码的○拓扑异构酶▽II(非洲 猪◁瘟病毒拓扑异构酶II)的各样构象的机闭。该酶雷同于人类拓◁扑异构酶II,具有相易机闭域 的○○同二聚体机闭,但缺乏特别的C端机闭域,这注 脚拓扑异◁ 构酶□…II的局面更原始。然而,其他病 ■毒(如噬菌体)编码的拓扑异构…□□酶II的机 …闭和机制如故有限,卓殊是斟■酌 到T4噬 菌体拓扑异构酶II的怪异机闭域构成(三个亚基,缺乏CTD)。探求探求了噬菌体T4和T6(以下简称 T4 Topo II和T6 T op o II)编码的拓扑异构酶II的机闭和功效特点,并探求了它们正在相应的T-even型噬菌体中的潜正在 效用。

  噬菌 ○体行为一种要紧的形 式生物,代外○了一○类依赖于细菌宿主举行孳生的怪异病毒。大肠杆菌 劝化 噬菌体重要有7种,3种偶数■T噬菌体(如T2、T4和T6)和4种奇数 T噬菌○体 (如T1、T3、T5、T7)。正在这些噬菌体中,它们 通 细致□胞▽裂 解 导 致 宿 主= △○碎裂,并编码己方的拓扑异构酶II。这些T-ev en型噬菌体正在机闭、抗原响应和遗传学上好像,dsDNA基 ◁因组相▽=对 较大,赶上160 kbp,包括约300个 ■盛开阅◁ 读 框。大基因组□的特点是通过链侵入重组和糖基化羟甲基胞嘧■啶(■HMC) DNA复制的环状布列的线性串联。